各位老铁们，大家好，今天由我来为大家分享pcr试剂，以及PCR各种试剂的作用的相关问题知识，希望对大家有所帮助。如果可以帮助到大家，还望关注收藏下本站，您的支持是我们最大的动力，谢谢大家了哈，下面我们开始吧！
本文目录
pcr试剂盒放在4℃还可以使用么
PCR试剂盒的限制因素主要是引物,但是引物在PCR过程中,特别是检测性的PCR中,引物的浓度可以比较低的.也就是说,如果你觉得试剂盒太贵,想多用几次,可以这么做,用你们平常的PCR体系,加上试剂盒的体系,混杂起来做PCR,譬如你平常都是做25μl的反应,你可以取5μl试剂盒中的体系加上你们自己的PCR体系20μl来做,这样相当于试剂盒多使用了5倍,结果绝对没影响.
主要有： 1.磁珠法核酸提取试剂盒2.磁珠法提取DNA试剂盒3.DNA提取试剂盒（离心柱法）4.磁珠法RNA提取试剂盒5.RNA提取试剂盒（离心柱法）6.磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒7.反转录试剂盒8.胶回收试剂盒9.PCR纯化试剂盒10.病毒核酸提取试剂盒
做实时定量pcr需要哪些试剂
1.提取mRNA所需试剂：
（1）Trizol，很多公司都有卖的，可以看你们实验室经常购买的公司是哪种，问公司技术员；
（2）异丙醇、无水乙醇、氯仿；
（3）RNase-free水，或DEPC处理水；
2.逆转录所需试剂：
一般使用现成的逆转录试剂盒，要实时定量PCR专用的。TAKARA公司的DRR036和DRR037就不错。
3.实时定量PCR所需试剂：
使用现成的实时定量PCR试剂盒。TAKARA公司和TOYOBO公司都有很多种，具体的要看你的实验要求，可以咨询对应公司技术员。
什么是PCR试剂
PCR试剂简单的理解就是用于做PCR的试剂。
实际做PCR的试剂很多，在这儿可以理解为达到PCR级别的试剂。试剂中不应该存在对PCR反应有影响的杂质。象核酸、核酸酶，如果是水的话，盐离子尽可能的小，最好是超纯水。象一些盐类，分析纯的就可以达到要求。
如果想做PCR，买点TAQ酶，dNTP就够了，引物找公司合成，模板自己提取。
pcr实验步骤详细
一、样品RNA的抽提
1.取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
2.两相分离每1 ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2 ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12 000 rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
3. RNA沉淀将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12 000 rpm离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
4. RNA清洗移去上清液，每1 mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1 ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7 000 rpm离心5分钟。
5. RNA干燥小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
6.溶解RNA沉淀溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
pcr扩增用的试剂有哪些
pcr扩增所用的试剂：
pcr扩增步骤：
1．细菌染色体DNA的提取（见上一组）
2．RAPD反应体系的配置（上图）
3·反应程序：将RAPD反应试剂加入EP管中轻混后用100ul石蜡油覆盖于反应混合液之上，防止样品在反复加热-冷却的过程中蒸发，盖好盖子。
打开PCR反应仪输入以下反应数据
· 94摄氏度预变性5min
· 94摄氏度变性40s
· 40摄氏度退火40s
· 72摄氏度延伸1min
将EP管放入仪器开始扩增，循环35次；72摄氏度延伸10min
注意事项：
1、PCR反应体系中DNA样品及各种试剂的用量都极少，必须严格注意吸样量的准确性及全部放入反应体系中。
2、为避免污染凡是用在PCR反应中的Tip尖、离心管、蒸馏水都要灭菌；吸每种试剂时都要换新的灭菌Tip尖。
3、加试剂时先加消毒三蒸水，最后加DNA模板和TaqDNA聚合酶。
4、置PCR仪进行PCR反应前，PCR管要盖紧，否则使液体蒸发影响PCR反应。
5、引物条件首先引物与模板的序列要紧密互补，其次引物与引物之间避免形成稳定二聚体或发夹结构，再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应（即错配）。
关于pcr试剂，PCR各种试剂的作用的介绍到此结束，希望对大家有所帮助。
